Tests d'évaluation secondaires du VIP : étude de... Infodoc

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Tests d'évaluation secondaires du VIP : étude des récepteurs au VIP et de l'adénylate cyclase de membranes de cellules épitheliales intestinales de rat

Titre :	Tests d'évaluation secondaires du VIP : étude des récepteurs au VIP et de l'adénylate cyclase de membranes de cellules épitheliales intestinales de rat Ajouter au panier
Auteur(s) :	Emmanuelle Charton, Auteur (et co-auteur)
Type de document :	Mémoire
Sujets :	Biochimie ; Rats
Résumé :	La liaison du VIP-125I a été étudiée sur les membranes de cellules épithéliales intestinales de rat. A 30°C, cette liaison est rapide, saturable et spécifique. A l'équilibre, à 30 minutes, le VIP porcin inhibe compétitivement la liaison du VIP-125I aux membranes d'entérocytes, pour des concentrations variant de 4.10-11 à 4.10 -7M (IC50 = 0,90 +- 0,37 nM). Le VIP stimule la production d'AMPc dans une même gamme de concentrations (EC50 = 0,62 +- 0,28 nM). L'analyse de Scatchard révèle la présence de deux classes de récepteurs au VIP : une classe de récepteurs de haute affinité (KD = 0,67 +- 0,28 nM) et de faible capacité (bmax = 230 +- 35 fmol/mg de protéines membranaires) ; une classe de basse affinité (KD = 92 +- 25 nM) et de haute capacité (Bmax = 2670 +- 220 fmol/mg). Les analogues [...] La liaison du VIP-125I a été étudiée sur les membranes de cellules épithéliales intestinales de rat. A 30°C, cette liaison est rapide, saturable et spécifique. A l'équilibre, à 30 minutes, le VIP porcin inhibe compétitivement la liaison du VIP-125I aux membranes d'entérocytes, pour des concentrations variant de 4.10-11 à 4.10 -7M (IC50 = 0,90 +- 0,37 nM). Le VIP stimule la production d'AMPc dans une même gamme de concentrations (EC50 = 0,62 +- 0,28 nM). L'analyse de Scatchard révèle la présence de deux classes de récepteurs au VIP : une classe de récepteurs de haute affinité (KD = 0,67 +- 0,28 nM) et de faible capacité (bmax = 230 +- 35 fmol/mg de protéines membranaires) ; une classe de basse affinité (KD = 92 +- 25 nM) et de haute capacité (Bmax = 2670 +- 220 fmol/mg). Les analogues du VIP porcin inhibent la liaison du VIP-125I aux membranes suivant l'ordre d'affinité : VIP de porc > VIP de cobaye > Hélodermine > PHI > GRF de rat > sécrétine > GRF 1-29 humain. Des antagonistes spécifiques du VIP, (4-C1-D-Phe6-Leu17)-VIP et (N-Ac-tyr1,D-Phe2)-GRF ont également été testés sur ce modèle (IC50 respectives : 120 et 970 +- 210 nM). L'activité adénylate cyclase des membranes d'entérocytes est stimulée par la forskoline, la toxine du choléra, le NaF, le VIP et ses analogues. La stimulation par le VIP est GTP-dépendante. Les SR 44721 et 45103, analogues du GRF humain 1-29, montrent une forte affinité pour les récepteurs au VIP (IC50 = 7,9 +- 0,7 et 8,7 +- 0,9 nM respectivement) et sont de puissants agonistes du VIP sur l'adénylate cyclase intestinale de rat (ID50 = 3,3 +- 1,5 et 3,2 +- 0,2 nM respectivement). Ces produits sont 100 fois plus actifs que le GRF 1-29 humain et 7 à 8 fois plus actif que leur stéréoisomère. Le SR 44721 (ED50: 200nM) exerce comme le VIP (ED50: 2 nM) un effet relaxant sur veine porte hépatique isolée de rat. L'extrait de venin de serpent, SR 24, entre en compétition avec le VIP-125I (ID50 = 1/477 +- 1/224) et présente un profil d'antagoniste non compétitif du VIP sur l'adénylate cyclase de membrane intestinale de rat. (résumé de l'auteur)
Date de publication :	1988
Format :	1 vol. (14 p.), annexes (20 p.) / fig., tabl., annexes, bibliographie / 30 cm
Note(s) :	Mémoire de stage de 3ème année présenté à l'Institut national agronomique de Paris-Grignon, en vue de l'obtention du diplôme d'agronomie approfondie, spécialisation biochimie.
Langue(s) :	Français
Organisme d'accueil :	Laboratoire de biochimie exploratoire
Lien vers la notice :	https://infodoc.agroparistech.fr/index.php?lvl=notice_display&id=20742