Contribution à l'étude du rôle de l'hémolysine... Infodoc

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Contribution à l'étude du rôle de l'hémolysine SH-dépendante dans la virulence de Listeria Monocytogène

Titre :	Contribution à l'étude du rôle de l'hémolysine SH-dépendante dans la virulence de Listeria Monocytogène Ajouter au panier
Auteur(s) :	Jérôme Mengaud, Auteur (et co-auteur) Pascale Cossart, Responsable de stage Institut national agronomique Paris-Grignon, Etablissement de soutenance
Type de document :	Mémoire
Sujets :	Listeria monocytogenes -- Analyse -- Thèses et écrits académiques
Résumé :	Le travail présenté dans ce mémoire s'inscrit dans le cadre d'une étude génétique de la virulence d'une bactérie pathogène à multiplication intracellulaire, Listeria monocytogenes. Un mutant non hémolytique qui s'était avéré avirulent, avait été obtenu par mutagénèse par transposition, à l'aide du transposon Tn1545 (J.L. Gaillard et al. 1986). Une seule copie du transposon s'était insérée dans le chromosome. Par immunodétection, à l'aide d'un sérum anti-listériolysine O, il avait été montré que le mutant non hémolytique secrétait une protéine plus courte que celle produite par la souche sauvage. Nous avons, par clonage et séquençage, analysé la région d'insertion de ce transposon. Nous avons montré qu'il s'était inséré dans une longue phase ouverte de lecture dont la séquence peptidi[...] Le travail présenté dans ce mémoire s'inscrit dans le cadre d'une étude génétique de la virulence d'une bactérie pathogène à multiplication intracellulaire, Listeria monocytogenes. Un mutant non hémolytique qui s'était avéré avirulent, avait été obtenu par mutagénèse par transposition, à l'aide du transposon Tn1545 (J.L. Gaillard et al. 1986). Une seule copie du transposon s'était insérée dans le chromosome. Par immunodétection, à l'aide d'un sérum anti-listériolysine O, il avait été montré que le mutant non hémolytique secrétait une protéine plus courte que celle produite par la souche sauvage. Nous avons, par clonage et séquençage, analysé la région d'insertion de ce transposon. Nous avons montré qu'il s'était inséré dans une longue phase ouverte de lecture dont la séquence peptidique déduite a été comparée à la séquence de deux autre hémolysines SH-dépendantes, la streptolysine O et la pneumolysine. Ceci a permis d'identifier sans ambiguïté le gène de structure de la listériolysine O (nommé hly A). Ces résultats laissent supposer que le locus chromosomique de L. monocytogenes contenant le gène hly A est essentiel pour sa virulence. En utilisant comme sonde le fragment cloné correspondant à la région d'insertion du transposon Tn1545, nous avons pu montrer que le gène hly A était présent sur le cosmide pCL102 isolé par le groupe de F. Baquerto. Ce cosmide avait été isolé en clonant un fragment d'ADN chromosomique de Listeria monocytogenes conférant à E. coli un phénotype hémolytique sur boite de gélose au sang. L'expression de la listériolysine O dans les extraits bactériens avait été confirmée par immunodétection. Nous avons entièrement séquencé le gène et analysé la séquence peptidique déduite. Par des expériences d'hybridation de type Southern avec l'ADN chromosomique, en utilisant comme sonde des fragments internes au gène, nous venons de montrer que certains réarrangements ont eu lieu dans le fragment cloné dans le cosmide pCL102. Nous avons recloné la région portant hly A en vue de son étude fonctionnelle détaillée. (résumé de l'auteur)
Date de publication :	1987
Format :	1 vol. (30 p.) / fig., tabl., bibliographie / 30 cm
Langue(s) :	Français
Organisme d'accueil :	Institut Pasteur, 28 rue du docteur Roux - 75724 Paris cedex 15
Lien vers la notice :	https://infodoc.agroparistech.fr/index.php?lvl=notice_display&id=20345