Utilisation du poliovirus comme vecteur d'expressi... Infodoc

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Utilisation du poliovirus comme vecteur d'expression de motifs antigéniques hétérologues

Titre :	Utilisation du poliovirus comme vecteur d'expression de motifs antigéniques hétérologues Ajouter au panier
Auteur(s) :	Annette Martin, Auteur (et co-auteur) Institut national agronomique Paris-Grignon, Etablissement de soutenance
Type de document :	Mémoire
Sujets :	Poliovirus -- Thèses et écrits académiques ; Génétique moléculaire
Résumé :	Nous avons utilisé le cADN du poliovirus de type1 souche Mahoney, comme vecteur d'expression de motifs antigéniques hétérologues. En travaillant sur un cADN tronqué du poliovirus, nous avons pu créer, à l'aide de la technique de mutagénèse dirigée par oligonucléotide synthétique, des sites de restriction uniques de part et d'autre de l'épitope C3, motif antigénique immunogène exposé à la surface de la capside du virus. Ces sites ont permis de déléter la séquence nucléotidique codant pour cet épitope séquentiel (9 acides aminés) et de la remplacer par celle d'un épitope, connu ou putatif, d'un virus hétérologue. Des oligonucléotides correspondant aux séquences de l'épitope équivalent au C3 pour la souche Lansing du poliovirus de type 2, d'une part, et de deux épitopes putatifs du vir[...] Nous avons utilisé le cADN du poliovirus de type1 souche Mahoney, comme vecteur d'expression de motifs antigéniques hétérologues. En travaillant sur un cADN tronqué du poliovirus, nous avons pu créer, à l'aide de la technique de mutagénèse dirigée par oligonucléotide synthétique, des sites de restriction uniques de part et d'autre de l'épitope C3, motif antigénique immunogène exposé à la surface de la capside du virus. Ces sites ont permis de déléter la séquence nucléotidique codant pour cet épitope séquentiel (9 acides aminés) et de la remplacer par celle d'un épitope, connu ou putatif, d'un virus hétérologue. Des oligonucléotides correspondant aux séquences de l'épitope équivalent au C3 pour la souche Lansing du poliovirus de type 2, d'une part, et de deux épitopes putatifs du virus de l'hépatite A (HAV), d'autre part, ont été synthétisés. Nous les avons insérés dans le cADN du poliovirus en remplacement de l'épitope C3, puis nous avons reconstitué les cADN complets du poliovirus, contenant de courtes séquences hétérologues. Par transfection des cellules de primates avec les cADN hybrides, nous avons obtenu des virus recombinants poliovirus type1/type2 ou poliovirus type1/HAV viables, possédant une capside mosaïque. Ces virus recombinants ont été caractérisés par des tests sérologiques. Ils n'ont pas réagi avec l'anticorps monoclonal dirigé contre l'épitope C3 du poliovirus type1, et les virus hybrides type1/type2 ont réagi spécifiquement avec un sérum polyclonal dirigé contre le poliovirus type2. Ceci prouve que l'épitope hétérologue du poliovirus type2 est exprimé à la surface de la capside des virus hybrides. (résumé de l'auteur)
Date de publication :	1987
Format :	1 vol. (22 p.) / fig., tabl. bibliographie / 30 cm
Note(s) :	Mémoire présenté à l'Institut national agronomique de Paris-Grignon, en vue de l'obtention d'un DAA, option Microbiologie et génétique des microorganismes, mention génétique moléculaire
Langue(s) :	Français
Organisme d'accueil :	Institut Pasteur, Paris
Lien vers la notice :	https://infodoc.agroparistech.fr/index.php?lvl=notice_display&id=20339