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Titre : |
Analyse et ingénierie des séquences promotrices pour une expression optimisée des cellulases chez Trichoderma reesei
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Auteur(s) : |
Claire Derlot, Auteur
Jean-Marie Beckerich, Directeur de thèse |
Type de document : | Thèse |
Résumé : |
Pour la production de bioéthanol de deuxième génération à l’échelle industrielle, les enzymes responsables de la dégradation de la biomasse lignocellulosique en sucres simples sont produites par le champignon filamenteux Trichoderma reesei sous induction par le lactose. Ce sucre induit efficacement la production de cellulases et, dans une moindre mesure, celle des hémicellulases. Cependant, il représente un substrat relativement couteux et sa substitution, partielle ou totale, par un autre sucre pourrait permettre de réduire significativement le coût des enzymes sécrétées. Dans ce contexte, la valorisation des sucres en C5 contenus dans le résidu liquide obtenu en sortie de l’étape de prétraitement physico-chimique de la biomasse apparaît comme une alternative intéressante. Ces pentos[...]
Pour la production de bioéthanol de deuxième génération à l’échelle industrielle, les enzymes responsables de la dégradation de la biomasse lignocellulosique en sucres simples sont produites par le champignon filamenteux Trichoderma reesei sous induction par le lactose. Ce sucre induit efficacement la production de cellulases et, dans une moindre mesure, celle des hémicellulases. Cependant, il représente un substrat relativement couteux et sa substitution, partielle ou totale, par un autre sucre pourrait permettre de réduire significativement le coût des enzymes sécrétées. Dans ce contexte, la valorisation des sucres en C5 contenus dans le résidu liquide obtenu en sortie de l’étape de prétraitement physico-chimique de la biomasse apparaît comme une alternative intéressante. Ces pentoses induisent efficacement les gènes d’hémicellulases et leurs promoteurs sont donc une cible de choix pour transférer l'inductibilité par les pentoses aux gènes de cellulases. Des motifs de séquence au sein des promoteurs des deux principaux gènes de xylanases (xyn1 et xyn2), identifiés comme responsables de l’induction de ceux-ci par les C5, ont été choisis pour intégration dans un promoteur de gène impliqué dans la dégradation de la cellulose. Cinq constructions de promoteurs chimères différentes contrôlant l’expression du gène codant pour la β- glucosidase bgl1 ont ainsi été réalisées et leur inductibilité par les sucres C5 étudiée. Dans certains cas, une induction importante de bgl1 par les sucres C5 ou le xylane a effectivement été détectée. Les possibilités et l’intérêt d’une application étendue à d’autres gènes de cellulases et dans une souche industrielle sont discutées. Par ailleurs, l’ « effet-position » du gène sur son expression a aussi été étudié, toujours dans l’objectif d’optimiser l’expression des gènes (hémi)cellulolytiques chez T. reesei.
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Editeur(s) : | Paris [France] : AgroParisTech |
Date de publication : | 2015 |
Format : | 1 vol. (181 p.) |
Note(s) : |
Bibliographie p. 169-181
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Langue(s) : | Français |
Lien vers la notice : | https://infodoc.agroparistech.fr/index.php?lvl=notice_display&id=195405 |
Exemplaires
Localisation | Emplacement | Pôle | Section | Cote | Support | Disponibilité |
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aucun exemplaire |
Documents numériques (1)
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